产品货号：
M20034
中文名称：
Bst DNA聚合酶大片段
英文名称：
Bst DNA Polymerase, Large Fragment
产品规格：
800U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，来源于E.coli菌株，是在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。该酶具有5'→3'DNA聚合酶活性，但不具有5'→3'外切核酸酶活性，可应用于DNA测序、DNA标记和等温DNA扩增等。
| 来源 | E.coli |
| 反应条件 | 1×反应缓冲液，65℃温浴 |
| 热失活 | 80℃，20min |
65℃条件下，30min内使10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
| 组分 | 规格 |
| Bst DNA聚合酶大片段(8U/μL) | 100μL |
| 10×Bst LF Buffer with Mg2+ | 2mL×2 |
| dNTPs (10mM each) | 200μL |
保存：-20℃，有效期1年。
50mM KCl，10mM Tris-HCl (pH7.5)，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.1% Triton X-100和50% Glycerol。
10×Bst LF Buffer with Mg2+：
200mM Tris-HCl，100mM (NH4)2SO4，500mM KCl，20mM MgSO4，1% Tween 20，pH8.8。
- Bst DNA聚合酶不具有3'→5'外切酶活性。
- 长期贮存需加入100μg/mL BSA或0.1% Triton X-100。
- 建议反应温度不要超过70℃。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 将10×Bst LF Buffer with Mg2+取出，冰上解冻，使用前涡旋10sec混匀，并短暂离心收集。
- 除模板DNA外，其余组分按下表顺序配制反应混合液(反应体系为25μL)。
成分 用量 终浓度 10×Bst LF Buffer 2.5μL - F3/B3 - 0.2μM FIP/BIP - 0.8μM 甜菜碱 - 1M dNTPs - 400μM M13 ssDNA模板 2μL - Bst DNA聚合酶大片段(8U/μL) 1μL - ddH2O 至25μL - - 为了防止在配制试剂时发生污染，请务必在超净工作台内进行操作；
- 试剂及模板DNA的配制操作最好在不同的区域进行，以免发生污染。
- 为了防止在配制试剂时发生污染，请务必在超净工作台内进行操作；
- 用移液器轻轻吹打混匀，并确保反应体系中无气泡，而后离心收集，过程中请勿剧烈震荡以免使酶失活。
- 用移液器吹打混匀，并短暂离心收集。
- 60～65℃恒温孵育1h。
- 如果实验需要，可以在2%的琼脂糖凝胶上进行电泳分析。
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